患者源性異種移植（PDX）鼠腫瘤模型是將患者新鮮腫瘤組織移植至免疫缺陷小鼠體內(nèi)而構(gòu)建的活體模型，主要的優(yōu)勢在于完整保留原發(fā)腫瘤的分子生物學(xué)特征、組織病理學(xué)結(jié)構(gòu)及腫瘤微環(huán)境的異質(zhì)性，能高度模擬人類腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移及藥物治療的反應(yīng)，已成為腫瘤基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的重要工具。由于其更貼近病人的腫瘤遺傳特性和異質(zhì)性，PDX模型不斷受到藥企和科研院所的青睞。

一、PDX鼠腫瘤模型的標(biāo)準(zhǔn)化構(gòu)建流程

PDX模型的構(gòu)建需遵循嚴(yán)格的無菌操作與質(zhì)量控制規(guī)范，流程包括腫瘤樣本的獲取與處理、移植宿主的選擇、異源腫瘤組織的移植操作、移植術(shù)后監(jiān)測及傳代驗(yàn)證五個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

PDX模型在構(gòu)建過程中受制于異源移植物免疫反應(yīng)，所以免疫缺陷動(dòng)物選擇很重要，需要確保人類腫瘤組織順利生長，移植宿主的選擇需選用免疫缺陷小鼠以避免移植排斥反應(yīng)。常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系包括：

裸鼠（先天性胸腺缺失，T細(xì)胞缺陷）；

NOD-SCID小鼠（T、B細(xì)胞雙重缺陷，無自然殺傷細(xì)胞活性）；

B-NDG小鼠（重度免疫缺陷，缺乏成熟T、B、NK細(xì)胞）

二、移植后監(jiān)測與成瘤驗(yàn)證

1. 常規(guī)監(jiān)測：移植后每日觀察小鼠精神狀態(tài)、飲食及活動(dòng)情況，測量計(jì)算腫瘤體積，繪制生長曲線。

2. 成瘤判定：腫瘤體積生長至一定體積時(shí)判定為成瘤成功。

3. 特征驗(yàn)證：成瘤后通過HE染色、免疫組化（IHC）等方法，驗(yàn)證移植瘤與患者原發(fā)腫瘤的組織形態(tài)、分子標(biāo)志物及基因組特征一致性，確保模型有效性。

三、PDX腫瘤模型中的人源鼠源比例檢測

為維持模型穩(wěn)定性，需將一代移植瘤傳代以后的模型可用于正式實(shí)驗(yàn)。隨著腫瘤培養(yǎng)和傳代次數(shù)的增加，人源比例可能隨傳代下降，甚至出現(xiàn)第 3 代后幾乎無人源間質(zhì)細(xì)胞，被鼠源基質(zhì)取代，人源細(xì)胞比例逐漸降低，腫瘤保真度下降。人源比例的下降可能會(huì)導(dǎo)致失去原始腫瘤的組織架構(gòu)和分化特征，基因表達(dá)譜與原始腫瘤差異增大，影響腫瘤標(biāo)志物，對(duì)治療的敏感性與臨床實(shí)際不符，導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性/陽性結(jié)果，影響藥物研發(fā)決策。

翼和生物開發(fā)的PDX模型質(zhì)控檢測試劑盒PDX50采用雙色熒光探針 qPCR（FAM+HEX）檢測PDX模型總DNA中小鼠DNA的比例，并以此推導(dǎo)小鼠細(xì)胞浸潤比例，檢測對(duì)象為腫瘤組織DNA。試劑盒具有以下特點(diǎn)：

1. 穩(wěn)定：全程閉管操作，無交叉污染。

2. 可靠：樣本與多個(gè)內(nèi)標(biāo)同板檢測，減少孔間干擾。

3. 方便：操作簡單，無需電泳步驟。

4. 定量：△CT 值，可定量檢測

PDX模型成功后需要進(jìn)行PDX腫瘤模型中的人源鼠源比例檢測，對(duì)模型的質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估，保重模型的成功，對(duì)后續(xù)的研究和治療提供有利的保障。