實(shí)驗(yàn)動物的質(zhì)量管理對實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)、動物實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的順利開展有著非常重要的意義，所以需要靈敏、快速、特異性高、性價(jià)比高的檢測方案，來實(shí)現(xiàn)動物病原微生物的檢測和篩查。2023年7月1日，新的國家標(biāo)準(zhǔn)GB 14922—2022 《實(shí)驗(yàn)動物 微生物、寄生蟲學(xué)等級及監(jiān)測》正式實(shí)施，新國標(biāo)對一些項(xiàng)目和內(nèi)容進(jìn)行了調(diào)整，增加了選取哨兵動物作為檢測用動物。

大小鼠細(xì)菌真菌檢測方法——培養(yǎng)法

對于檢測方法新國標(biāo)中指出：“按 GB/T 14926(所有部分)和 GB/T 18448(所有部分)的規(guī)定對第5章的所有指標(biāo)要求逐項(xiàng)進(jìn)行檢測"。其中GB/T 14926是對病毒、病原菌檢測方法的介紹，GB/T 18448是對寄生蟲檢測方法的介紹。病原菌檢測則多采用菌落形態(tài)，菌體形態(tài)，生化反應(yīng)，血液凝集反應(yīng)等檢測方法。GB/T 14926.1-2001 《實(shí)驗(yàn)動物 沙門菌檢測方法》中描述了沙門菌的檢測，檢測原理是看菌落形態(tài)，菌體形態(tài)，生化反應(yīng)，血液凝集反應(yīng)等。沙門菌在培養(yǎng)基上有特定的生長、形態(tài)和生理生化特征；菌體抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，產(chǎn)生凝集反應(yīng)。GB/T 14926.17-2001《實(shí)驗(yàn)動物 綠膿桿菌檢測方法》中描述了綠膿桿菌的檢測方案，觀察和測試菌落形態(tài)，菌體形態(tài)，氧化酶試驗(yàn)，生化試驗(yàn)。綠膿桿菌是革蘭陰性桿菌，具有產(chǎn)生綠色色素和氧化酶等生化試驗(yàn)特征，可利用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)、菌體檢驗(yàn)和生化試驗(yàn)進(jìn)行鑒定，主要特點(diǎn)是綠色。

大小鼠細(xì)菌真菌檢測方法——PCR法

培養(yǎng)法是傳統(tǒng)的細(xì)菌真菌的檢測方法，目前也有一些其他的病原體檢測方法，如PCR檢測法，也就是PCR檢測結(jié)合電泳分析、熒光定量PCR檢測等。近幾年公布的一些地方標(biāo)準(zhǔn)和團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)中就包含有核酸檢測的方法。如2025年7月中國獸醫(yī)協(xié)會CVMA 發(fā)布和實(shí)施了三項(xiàng)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)，其中一項(xiàng)是T/CVMA 274—2025 《實(shí)驗(yàn)動物 鼠棒狀桿菌熒光PCR檢測方法》，文件規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動物鼠棒狀桿菌的熒光PCR檢測方法，適用于實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠的鼠棒狀桿菌定性檢測。T/CALAS 20-2017 《實(shí)驗(yàn)動物 牛棒狀桿菌檢測方法》，文件中牛棒狀桿菌檢測方法包括培養(yǎng)法和PCR法。

目前市面上提供的熒光定量PCR檢測試劑盒包括單重檢測和多重檢測兩種，相比較單重檢測來說，多重?zé)晒舛縋CR檢測方法的成本更低廉，更符合降本增效的原則。翼和生物采用多重?zé)晒舛縬PCR檢測方案，開發(fā)了多款針對SPF大鼠小鼠的病毒和病原菌檢測試劑盒，檢測的病原項(xiàng)目符合國標(biāo)GB14922—2022中的病毒和細(xì)菌、真菌的檢測項(xiàng)目要求。翼和生物聯(lián)檢試劑盒中一個(gè)熒光通道可以同時(shí)檢測2-3種病原菌，但是不進(jìn)行具體病原菌的鑒定，也就是說一旦這個(gè)熒光通道有信號陽性，那么這2-3種病原菌都有可能是陽性。國標(biāo)病原菌必檢八項(xiàng)聯(lián)檢試劑盒、國標(biāo)病原菌選檢七項(xiàng)聯(lián)檢試劑盒。病原菌鑒定試劑盒中一個(gè)熒光通道只鑒定一種病原菌，所以可以通過熒光通道直接判斷感染的具體病原菌。我們的鑒定試劑盒可以搭配聯(lián)檢試劑盒使用。我們還提供DNA/RNA核酸共提取試劑盒。實(shí)驗(yàn)流程方便快捷，總體實(shí)驗(yàn)過程大概4小時(shí)。

總之當(dāng)前病原體的檢測越來規(guī)范，對試劑盒檢測效率、準(zhǔn)確度和成本控制的要求越來越高。病原體有相當(dāng)大的市場需求，伴隨著這些市場需求，檢測方法會越來越成熟，PCR的方法應(yīng)用會越來越多。