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大小鼠中綠膿桿菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、奇異變形桿菌 3種常見病原菌的檢測
發(fā)布時間: 2025-11-21 點擊次數(shù): 123次三種常見病原菌
綠膿桿菌(Pa)是革蘭氏陰性桿菌,廣泛存在于自然界中,常寄生于人和動物的體表、呼吸道、消化道,免疫力下降是重要的發(fā)病誘因,在燒傷感染中綠膿桿菌檢出率較高。綠膿桿菌是SPF級小鼠必檢項目, 主要定植于腸道內(nèi)和糞便中。對實驗動物而言,SPF 小鼠及無菌小鼠被綠膿桿菌感染后,多數(shù)不表現(xiàn)癥狀,當(dāng)宿主免疫系統(tǒng)受損,??梢鸶腥?、炎癥、敗血癥甚至死亡等。但進行醫(yī)藥、生物制品實驗時,常影響試驗結(jié)果,導(dǎo)致實驗的失敗,故綠膿桿菌已被列為無特定病原體小鼠必須排除的細菌之一。
產(chǎn)酸克雷伯菌(Ko)是克雷伯菌屬中的一個重要物種,形態(tài)呈直桿狀,大多數(shù)菌株具有多糖莢膜,無鞭毛,無芽孢。產(chǎn)酸克雷伯菌目前未被列為SPF級動物必須排除的病原體。但是產(chǎn)酸克雷伯菌是實驗室常見病原菌,被杰克遜(JAX)實驗室明確列為“排除性病原體",即其供應(yīng)的所有品系實驗動物(尤其是免疫缺陷品系)均要求無此菌定植。免疫缺陷小鼠是該菌的高風(fēng)險群體,研究發(fā)現(xiàn),免疫缺陷小鼠中產(chǎn)酸克雷伯菌的檢出率達4.55%。
奇異變形桿菌(Pm)屬于變形桿菌屬,是一種重要的條件致病菌。菌體呈直桿狀,具有周身鞭毛,因此運動性非?;钴S。顯著的特征之一是在固體培養(yǎng)基(如營養(yǎng)瓊脂)上的“遷徙生長"或“群游"現(xiàn)象。
常見病原菌的檢測
這三種菌在清潔級實驗動物中檢出率較高,檢測目前多采用培養(yǎng)法的檢測方法, 即通過分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)特征和生化反應(yīng)特征來確定動物體中是否感染病原菌。通過幾天的培養(yǎng)后觀察病原菌的形態(tài)、染色等生化反應(yīng),判斷菌的種類,這種檢測方法對實驗人員的經(jīng)驗要求比較高,培養(yǎng)時間比較長,需要一種快捷的檢測方案實現(xiàn)三種菌的檢測,并且檢測準(zhǔn)確度高,靈敏度高。
當(dāng)前檢測病原菌的一種有效的手段是qPCR的檢測方案。翼和生物開發(fā)的Biowing®SPF級大小鼠常見病原菌qPCR檢測試劑盒,采用高靈敏度和特異性的探針法qPCR技術(shù),專為在多種樣本類型中快速、高靈敏地篩查SPF級實驗室大小鼠常見的病原菌而設(shè)計,可快速檢測綠膿桿菌(Pa)、產(chǎn)酸克雷伯菌(Ko)、奇異變形桿菌(Pm)常見病原菌。一管中分別在FAM(銅綠假單胞菌Pa),HEX(產(chǎn)酸克雷伯菌Ko),ROX(奇異變形桿菌Pm)三個通道檢測3種病原菌。另外設(shè)計一套引物探針在CY5通道檢測內(nèi)參DNA。該試劑盒具有以下特點:靈敏:檢測靈敏度較高,10 CFU可被有效檢出。穩(wěn)定:全程閉管操作,無交叉污染??煽浚汉瑑?nèi)參對照,避免假陰性。方便:操作簡單,一步法檢測。
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